關(guān)于色譜圖，色譜圖常見問題主要有三類: 1.色譜峰峰形異常問題，例如，負(fù)峰,寬峰,肩峰,雙峰,峰形不對稱等。2.色譜圖中多峰、少峰問題，色譜圖未出峰,出峰比預(yù)想的多等。3.色譜峰保留時間問題，保留時間不穩(wěn)定等。

色譜峰形問題的來源：1.色譜柱毀壞：溶解樣品的溶劑不當(dāng)；第二種相互作用；色譜柱過載；質(zhì)量過載；體積過載；其它柱外效應(yīng)；管路連接；采樣速率；時間常數(shù)。2.色譜峰形異常問題分析：色譜峰峰形異常包括峰比預(yù)想的要小；樣品粘度過大；進(jìn)樣器有問題或進(jìn)樣體積有誤；檢測器設(shè)置不正確,定量環(huán)(Loop)體積不正確；檢測器輸出未置零；用了不正確的檢測器輸出信號；檢測池被污染；檢測器的燈可能有問題。

色譜圖多峰少峰問題分析： 色譜圖中未出峰，進(jìn)樣問題或未進(jìn)樣或樣品分解，流動相問題：泵未輸液或流動相不正確；檢測器設(shè)置不正確，或檢測器有問題。色譜圖中出峰比預(yù)想的少，樣品分解；色譜柱柱效喪失；用錯流動相；梯度洗脫時平衡不足。色譜圖多峰少峰問題分析(2)：色譜圖中出峰比預(yù)想的多(鬼峰)；樣品分解或制樣時導(dǎo)入了雜質(zhì)；流動相被污染,或用錯流動相；流動相中含有穩(wěn)定劑或穩(wěn)定劑發(fā)生變化；前次進(jìn)樣的后流出物(某些Rt值特大的組分)；進(jìn)樣器被污染,洗針系統(tǒng)出問題或注射器臟；未充分平衡進(jìn)樣器Loop管；保護(hù)柱臟,色譜柱被污染,分辨率下降。

色譜峰保留時間問題分析：1.保留時間飄忽不定(各次運(yùn)行之間) 系統(tǒng)不穩(wěn)定或未達(dá)化學(xué)平衡，泵壓力不穩(wěn)(泵頭里有氣泡)，進(jìn)樣體積過大或樣品濃度過大，溫度波動，流動相混合不均勻，色譜柱被污染，保留時間增加或減少(各次運(yùn)行之間) 系統(tǒng)不穩(wěn)定或化學(xué)平衡不足；泵流速變化；溫度變化；色譜柱污染，柱效下降；流動相被污染：溶劑入口過濾器堵或管路堵塞；系統(tǒng)滲漏。2. 保留時間改變到一個新的恒定值；流動相不正確或其組成不正確；泵流速變化；實(shí)際輸液的流速不正確(泵失靈或故障)；環(huán)境溫度變化；柱溫不正確；色譜柱尺寸或類型不正確；色譜柱被污染；流動相含有穩(wěn)定劑或穩(wěn)定劑發(fā)生變化；輸液系統(tǒng)的梯度滯后體積不正確。

保留時間重現(xiàn)性：pH的影響。化學(xué)因素，中性物質(zhì):無影響；酸性物質(zhì)：pH增加，保留降低；堿性物質(zhì)：pH增加，保留增加。

---本文摘自實(shí)驗(yàn)與分析